ICOA - Université d'Orléans

Lieu de travail

Champs scientifiques

Date limite de candidature

Ce stage s’inscrit dans le cadre d’une collaboration entre deux laboratoires : le laboratoire de Physiologie, Ecologie et Environnement (P2E UR1207) et l'Institut de Chimie Organique et Analytique (ICOA).

Contexte scientifique
Les récepteurs nicotiniques de l'acétylcholine neuronaux (n ACh R) présentent un intérêt particulier car ils représentent les principales cibles des insecticides néonicotinoïdes, qui sont importants en agriculture pour contrôler les insectes nuisibles, et en médecine vétérinaire pour prévenir la transmission de maladies par les arthropodes, aidant ainsi à lutter contre les insectes nuisibles et les vecteurs de maladies animales et humaines.
Pour faciliter les études biochimiques et structurales des récepteurs nicotiniques d'insectes, nous cherchons à surexprimer les sous unités du récepteur nicotinique de de l'abeille Apis mellifera et de la blatte Periplaneta americana en utilisant un système d'expression recombinant procaryote.
Le projet s’articule en trois étapes :

• Développer et optimiser des méthodes efficaces pour la production et la purification des protéines membranaires recombinantes.
• Évaluer la fonctionnalité des protéines exprimées et purifiées.
• Caractériser les propriétés biochimiques et structurales de ces protéines, en utilisant différentes techniques de biochimie.

Missions principales :
Le / la stagiaire sera impliqué (e) dans plusieurs aspects clés du projet, notamment :
1- Optimisation du clonage : mise en œuvre de techniques avancées de clonage pour insérer les gènes d’intérêt dans des vecteurs d'expression adaptés.
2- Optimisation de la production des protéines membranaires recombinantes dans E. coli
3- Purification des protéines : application de techniques de purification adaptées aux protéines membranaires

Profil recherché
Nous recherchons un(e) candidat(e) possédant les compétences suivantes :

• Biologie moléculaire : Maîtrise des techniques de clonage moléculaire (PCR, mutagenèse dirigée, ligation, transformation, etc.).

• Biochimie : Expérience dans la purification des protéines, leur caractérisation (par exemple, électrophorèse, spectrophotométrie) et une compréhension des techniques de reconstitution des protéines.

• Une bonne connaissance des systèmes d'expression recombinante E. coli serait un atout majeur.

Dès que possible